待测细胞被制备成单细胞悬液,经特异性荧光染料染色后置于专门样品管中,在气体压力推动下被压入流动室,流动室内充满鞘液(不含细胞或微粒的缓冲液),在高压作用下从鞘液管喷出包裹细胞,使细胞排成单列形成细胞液柱,依次通过检测区。液柱与高度聚焦的激光束垂直相交,被荧光染料染色的细胞受到激光激发产生荧光信号和散射光信号,这些光信号通过波长选择的滤光片,由相应的光电管和电子检测器接收并转换成电信号,经放大器放大后送入计算机并进行分析显示和结果输出,测定的结果常用单参数直方图、双参数散点图、轮廓(等高)图和三维立体图来表示。而带有细胞分选功能的流式细胞仪对细胞的分选是由分选器来完成。待分选的细胞在形成液滴时被充以特定的电荷,并通过超高频的压电晶体产生高频振荡,使液柱断裂成均匀的液滴,带有电荷的液滴向下落入偏转板的高压静电场时,按照所带电荷发生偏转,落入指定的收集器内,完成分类收集的目的。我们开发并验证流式细胞术的倍性鉴定方法,用它来探索倍性比的季节性波动和影响该物种野生种群的环境因素。上海Sysmex倍性分析仪系统
菌类的基因组大小信息很少,只有不到 2000 个物种的信息可用。到目前为止,大多数记录都是使用静态的、基于显微镜的细胞计数方法获得的,或者来自基因组测序项目。流式细胞术现在被认为是获得基因组大小测量的较先进方法,并且可以使用适当的方法和 DNA 标准,从而能够以快速、可靠和廉价的方式分析大多数基因组大小范围。平均菌类基因组大小为 60 Mbp,但大小因系统发育而异,从 2.2到 3706 Mbp 。在几个菌类进化枝中,基因组大小的扩张似乎伴随着植物共生或植物寄生的进化,与植物相互作用的菌类似乎比腐生菌和与动物相互作用的菌类具有更大的基因组。虽然用于核 DNA 定量的流式细胞术在植物科学中常规用于基因组大小和倍性研究,但其在菌类生物学中的使用仍然很少。此处描述了适当的标准、方法和比较好实践,旨在促进流式细胞术在菌类基因组大小测量中更普遍和更多的应用。上海倍性分析仪试剂盒CyFlow Analyser倍性分析仪内置15TFT液晶显示屏提供两种不同的波长独特的仪器设计。
实验仪器:Sysmex CyFlow® Ploidy Analyser 倍性分析仪(Sysmex Partec)试剂盒:CyStain® UV Precise P(Sysmex Partec)实验步骤:1、取新鲜待测植物叶片 0.5 平方厘米,置于培养皿中2. 取 Partec CyStain UV Precise P 裂解液 400ul 加于植物叶片周围,用刀片将叶片切碎,以充分提取出完整的细胞核,持续 30-60 秒3. 将培养皿中的液体用 30um 滤网过滤至样品管中4. 向样品管中加入 Partec CyStain UV Precise P 的 DAPI 染液 1600ul5. 上机(CyFiow Analyser倍性分析仪)检测。
CyFlow Analyser倍性分析仪为DNA倍性分析和基因组大小检测提供了专门且适合的DNA荧光染料(DNPI、PI等)。进行基因组大小分析需要通过DNA嵌入染料进行化学计量染色,该染料应该具有较低的DNA峰值变异系数。所使用的365nm的紫外光源可以高效激发DAPI,DAPI作为一种荧光染料具有众多优点,众所周知的高分辨率DNA直方图、简单易用、且具有对其他细胞成分较低的敏感性等,这些特点使DAPI成为DNA倍性分析和异倍体分析的较好佳料。除DAPI外,532nm激光激发可以更高效的碘化丙啶(PI)染料,相比传统流式细胞仪使用的488nm激发,532nm激发下的PI得到的数据更准确。CyFlow Ploidy Analyser Demo 实 验结 果 很 好 , DAPI 通道 的 CV<2%。
CyFlow Analyser倍性分析仪:1、染色速度快:DNA倍体标本上机检测小于2分钟 。2、配备365nm光源,高效激发DAPI染料,避免RNA的影响和次生代谢物的影响 。3、配备532nm光源,高效激发PI染料,激发效率远超488nm和561激光器。 4、高精确性:DNA检测CV≤1%,适合高精度倍性实验。 5、专门且合适的DNA荧光染料(DAPI、PI等)。 6、灵活便捷:结构紧凑,便于移动,适用于多种工作场所。 7、应用:植物、动物DNA倍体检测,基因组大小检测,细胞周期检测。CyFlow Analyser倍性分析仪在医学、农业科学、育种水产养殖等应用领域提供完美解决方案。中国国产倍性分析仪生命科学用品
在分子生物学层次上,利用流式细胞仪测定植物基因组DNA含量,可直接确定再生植株的倍性。上海Sysmex倍性分析仪系统
CyFlowPloidyAnalyserDemo倍性分析仪开机前仪器检查:1)在开机之前,需要先确认连接线(包括电源线、鞘液瓶连接线和废液瓶连接线)是否连接正常。2)要确保鞘液瓶至少装有700ml的的鞘液(无菌、已过滤并且去除气泡),然后要把瓶盖旋紧。注意:鞘液太多会导致液流不稳。3)为了保证高质量的检测,建议使用SysmexPartecSheathFluid(orderno.04-4007)。4)建议至少一周更换一次鞘液,或者在每天使用前更换。5)在添加鞘液后,请确保鞘液瓶中的黄色过滤器中没有气泡!6)请确保废液瓶已经清空,并且瓶盖已经旋紧。注意:每个实验人员在使用前和使用后,都请把废液清空。在使用生物毒性样本时,建议在空的废液瓶中加入50ml0.5%次氯酸溶液(OrderNo04-4012),以做初始消毒。上海Sysmex倍性分析仪系统
广州双螺旋科学仪器有限公司是一家集研发、制造、销售为一体的高新技术企业,公司位于广州市黄埔区锐丰三街4号617房,成立于2015-04-17。公司秉承着技术研发、客户优先的原则,为国内{主营产品或行业}的产品发展添砖加瓦。臻准,美国艾科浦,锐讯生物,Sysmex,Eprerdia目前推出了数字PCR,纯水机,病理切片机,倍性分析仪等多款产品,已经和行业内多家企业建立合作伙伴关系,目前产品已经应用于多个领域。我们坚持技术创新,把握市场关键需求,以重心技术能力,助力精细化学品发展。臻准,美国艾科浦,锐讯生物,Sysmex,Eprerdia为用户提供真诚、贴心的售前、售后服务,产品价格实惠。公司秉承为社会做贡献、为用户做服务的经营理念,致力向社会和用户提供满意的产品和服务。广州双螺旋科学仪器有限公司以市场为导向,以创新为动力。不断提升管理水平及数字PCR,纯水机,病理切片机,倍性分析仪产品质量。本公司以良好的商品品质、诚信的经营理念期待您的到来!
ABOUT US
北京九山欢乐科技有限公司